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    納米流式(NanoFCM)外泌體檢測服務

    納米流式技術簡介

          
            納米流式檢測技術(NanoFCM)可以檢測低至30 nm 的外泌體的散射光信號,可以實現單個藻紅蛋白分子的檢測,并與背景完全區分。納米流式檢測技術可以建立起外泌體的單顆粒水平多參數定量分析標準方法,為推動外泌體在臨床疾病診斷和治療領域的廣闊應用提供了堅實的技術基礎。

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    納米流式技術優勢

    1、高分辨率和高精確度

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            納米流式與透射電鏡(TEM)及NTA的檢測結果比較,納米流式檢測技術不僅靈敏度非常高,而且散射光的分辨率可以媲美電子顯微鏡。同時,由于納米流式采用單粒子逐個測量計數的方式,所以每個粒子的信息都會記錄,并以直方圖的形式呈現,相較于NTA的整體預測,精確度更高。

    2、單顆粒水平多種蛋白標志物定量分析


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            用藻紅蛋白(PE)對識別外泌體蛋白標志物( CD9,CD63和CD81)的單克隆抗體(MAbs)進行染色,通過納米流式檢測,可以實現在單顆粒水平對外泌體的逐個計數,并對外泌體膜表面的單個或兩個蛋白標志物進行分別和組合定量分析。從分析結果中可以看出,結腸癌HCT15細胞上清中分離的外泌體CD9,CD63和CD81這三種標志物蛋白的表達量并不一致;同時表達有兩種蛋白標志物的外泌體比例更少(ACS Nano. 2018;12(1):671-680)。

    納米流式技術參數

     

    • 側向散射靈敏度:<30nm

    • 側向散射分辨率:40/50nm

    • 粒徑檢測范圍:7-1000nm

    • 熒光靈敏度:FITC<10MESF

    • 樣品通量:10,000 events/min

    • 樣品流速:2-60μL/min





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    納米流式其他應用



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    參考文獻

    1. Tian Y et al. Protein Profiling and Sizing of Extracellular Vesicles from Colorectal Cancer Patients via Flow Cytometry. ACS Nano. 2018;12(1):671-680

    2. Ma L et al. Label-Free Analysis of Single Viruses with a Resolution Comparable to That of Electron Microscopy and the Throughput of Flow Cytometry. Angew Chem Int Ed Engl. 2016;55(35):10239-43

    3. Chen C et al. Quantification of protein copy number in single mitochondria: The Bcl-2 family proteins. Biosens Bioelectron. 2015 Dec 15;74:476-82.

    4. Zhu S et al. Light-scattering detection below the level of single fluorescent molecules for high-resolution characterization of functional nanoparticles. ACS Nano. 2014;8(10):10998-1006

    5. Yang L et al. Detection and quantification of bacterial autofluorescence at the single-cell level by a laboratory-built high-sensitivity flow cytometer. Anal Chem. 2012;84(3):1526-32